酒精液体饲料-酒精性脂肪肝造模饲料

为模拟人类酒精性脂肪肝等酒精摄入引起的相关疾病模型，在造模过程中发展出了多种的实验动物酒精摄入方案，包括酒精注射、灌胃、饮水中加入酒精、酒精液体饲料等，各有优缺点。本文主要阐述酒精液体饲料的造模方式及相关注意点。

一般，酒精性脂肪肝造模分为NIAAA急性酒精性肝损伤和酒精性脂肪肝，二者的造模方案有所区别， 这个在很多老师同学的实验方案设计中并没有考虑到，因而产生一些错误或误差。

NIAAA急性酒精肝损伤的造模方法，通常为分为，过渡期、酒精液体饲料饲喂期、高度酒精灌胃造模期，过渡期之后，持续饲喂酒精液体饲料10天，然后再饲喂酒精液体饲料的同时，持续灌胃高度白酒（酒精度52度以上）三天，剂量为5 g/kg体质量，采血，检测相关指标

慢性酒精性脂肪肝，通常在过渡期之后，持续以酒精液体饲料饲喂4-6周造模，自由采食，采血、检测相关指标

酒精性脂肪肝常用测定指标有：血清ALT、AST的活性以及血清和肝脏中TG的含量，肝脏病理学检查（苏丹Ⅲ染色）、肝脏系数( % )等

关于酒精液体饲料，针对不同的应用方向，自酒精液体饲料出现后，设计出了较多的不同配方，其中使用最为广泛的是由DeCarli和Lieber在20世纪60年代首先采用的在液体饲料中加入酒精来喂养大鼠的方法而诞生的Lieber-DeCarli（LD）酒精液体饲料，另外还有基于Ain93标准调整的Ain93M及Ain93G液体饲料等。

用于建立模拟人类饮酒的动物模型的实验动物：有大鼠、小鼠、豚鼠、地鼠、雪貂、兔、微型猪、猴、狒狒，等等实验动物，广泛使用的是大鼠、小鼠、豚鼠等，如果是在猴、狒狒等非人灵长类动物上建模，酒精液体饲料中的酒精供能占比需要调整增高至50%以上。

经常有同学不明白酒精液体饲料的饲喂及配置方式，在此以Lieber-DeCarli（LD）液体饲料为例进行说明：

该饲料初始状态为含油粉末状饲料，根据不同的配置方式，可配置出两种液体饲料，即含酒精的酒精液体饲料组和不含酒精的对照组饲料

配置酒精液体饲料，将饲料粉末132.18g与水817.82g混合均匀后，再添加酒精50g，再次混合均匀，剩余的没有用完的，密封冷藏

对照组，132.18g饲料粉末，添加89.6g麦芽糊精，添加778.22g水，混合均匀即可

关于酒精液体饲料的饲喂：

酒精液体饲料，因为配置完成后是一种糊状的流体状态，常规的水瓶容易被堵住，所以建议采购出水口带滚珠的水瓶或者是液体饲料专用饲喂瓶，节省费用的话，可以在淘宝采购一种给宠物鸟的喂水瓶也可以使用。

关于液体饲料本身优缺点的说明：

Lieber-DeCarli（LD）液体饲料，作为最早出现、应用最为广泛的酒精性脂肪肝造模饲料，被广泛的认可，使用最多，但本款饲料本身的脂肪供能偏高，达到了35%脂肪供能，这已经属于高脂饲料范畴，如果是长期的饲喂的话，对照组本身也会产生非酒精性脂肪肝，那么，实验组的酒精性脂肪肝造模是酒精长期摄入引起的还是高脂肪引起的，数据可能存疑，因此，如果使用该液体饲料造模，建议再设定一组常规对照组，可以正常颗粒饲料或者Ain93标准液体对照饲料饲喂，作为交叉对比，增强数据可信度

Ain93标准液体饲料，该液体饲料是基于Ain93标注配置设计，脂肪供能符合正常饲料标准，营养素更为平衡，我司更为推荐以该款饲料作为实验饲料来建立酒精性脂肪肝等相关酒精摄入引起的疾病模型的建立。

其他液体饲料，液体饲料经过多年的发展，也发展出了应对各种需求的方案，例如高蛋白、高脂肪、营养素缺乏等，有具体需要可以联系我们为您提供技术支持。

过渡期饲喂说明：

鉴于酒精液体饲料，有别于常规饲料的口感及动物本身对酒精的厌恶，需要有一个过渡区间使实验动物接受酒精液体饲料，具体操作方法为，以一周七天为周期

第一天，使用不添加酒精的对照液体饲料，适应口感

第二天，液体饲料中添加1%无水乙醇

第三天，液体饲料中添加2%无水乙醇

第四天，液体饲料中添加3%无水乙醇

第五、六天，液体饲料中添加4%无水乙醇

第七天，换上正式的5%无水乙醇含量的酒精液体饲料

下方展示相关标准配方：

Diet Name	名称	单位热量值（kacl/g)	Liquid AIN-93M EtOH Diet Ain-93M液体酒精饲料	热量
Ingredient:	成分		g	kcal
Casein (80 Mesh)	酪蛋白（80目）	4	38.7	154.80
L-Cystine	L-胱氨酸	4	0.5	2.00
Cellulose	纤维素	0	13.8	0.00
Xanthan Gum	黄原胶	0	3	0.00
Maltose Dextrin	麦芽糖糊精	4	73.64	294.56
Sucrose	蔗糖	4	27.7	110.80
Soybean Oil	豆油(含TBHQ）	9	11.102	99.92
Mineral Mix #210052	混合矿物质 #210052	0.47	9.68	4.55
Vitamin Mix #310025	混合维生素#310025	3.8	2.77	10.53
Choline Bitartrate	酒石酸胆碱	2	0.69	1.38
95%Ethanol	95%酒精	5.35	67ml	340.53
Cold Water	蒸馏水	0	补充至1升	0.00
合计		181.582	1019.06

Diet Name	名称	单位热量值（kacl/g)	Liquid AIN-93G EtOH Diet AIN-93G液体酒精饲料	热量
Ingredient:	成分		g	kcal
Casein (80 Mesh)	酪蛋白（80目）	4	53	212
L-Cystine	L-胱氨酸	4	0.8	3.2
Cellulose	纤维素	0	13.3	0
Xanthan Gum	黄原胶	0	3	0
Maltose Dextrin	麦芽糊精	4	43.3	173.2
Sucrose	蔗糖		126.5	0
Soybean Oil	豆油（含TBHQ）	9	18.604	167.436
Mineral Mix #210032	混合矿物质 #210032	0.47	9.28	4.3616
Vitamin Mix #310025	混合维生素#310025	3.8	2.65	10.07
Choline Bitartrate	酒石酸胆碱	0	0.66	0
95%Ethanol	95%酒精	5.35	67ml	340.5275
Cold Water	蒸馏水	0	补充至1升	0
合计			271.094	910.7951

	L10016A		To Pre-Mix L10016A	# L10015		To Pre-Mix L10016A	# L10016
		kcal%	Add		kcal%	Add		kcal%
Protein		27			17			17
Carbohydrate		17			47			11
Fat		56			36			36
Ethanol								36
Total		100			100			100
kcal/gm				1			1
Ingredient	gm	kcal	gm	gm	kcal	gm	gm	kcal
Casein	41.4	166		41.4	166		41.4	166
DL-Methionine	0.3	1		0.3	1		0.3	1
L-Cystine	0.5	2		0.5	2		0.5	2
Matodextrin 42	25.6	102	89.6	115.2	461		25.6	102
Cellulose	10	0		10	0		10	0
Xantham Gum	3	0		3	0		3	0
Corn Oil	8.5	77		8.5	77		8.5	77
Olive Oil	28.4	256		28.4	256		28.4	256
Safflower Oil	2.7	24		2.7	24		2.7	24
Minerals – S10018	8.75	0		8.75	0		8.75	0
Vitamins – V10036	2.5	9		2.5	9		2.5	9
Choline Bitartrate	0.53			0.53			0.53
Ethanol, 100%	0	0		0	0	50	50	360
H2O			778.22	778.2	0	817.82	817.8	0
TOTAL	132.18	637		1000	996		1000	997

参考文献：

1. 两种 Lieber-DeCarli 液体饲料诱导的小鼠酒精性肝损伤模型的建立
2. 慢性酒精喂养加急性酒精灌胃的酒精性肝病小鼠模型（NIAAA 模型或 Gao-Binge 模型）